%0 Journal Article
%A 李纪元
%A 周兴文
%A 朱宇林
%T 金花茶查尔酮合成酶基因<em>CnCHS</em>的克隆及遗传转化研究
%D 2015
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2015.03.002
%J 植物研究
%P 327-332
%V 35
%N 3
%X 根据已发表的金花茶查尔酮合成酶（chalcone synthase，CHS）基因（<em>CnCHS</em>）序列设计全长扩增引物，以金花茶花瓣总cDNA为模板进行PCR扩增，成功获得了该基因cDNA全长。将扩增所得全长产物连接PMD18-T载体后转化大肠杆菌<em>E.coli</em> DH5&alpha;，提取质粒后经酶切、测序鉴定后，将其与双元表达载体pCAMBIA1300连接，成功构建了<em>CnCHS</em>基因的正义表达载体pCAM-CnCHS。将该重组表达载体转化农杆菌EHA105后，利用农杆菌介导法将<em>CnCHS</em>基因转入烟草，获得转基因烟草18株。利用PCR法及Southern blotting对所获得的转基因植株进行鉴定，结果显示<em>CnCHS</em>基因成功整合到烟草基因组中，阳性率达67%，并获得了单拷贝转基因植株。这些结果表明本研究成功构建了金花茶<em>CnCHS</em>基因对烟草的遗传转化体系，为深入研究<em>CnCHS</em>基因的功能及其对花色的调控效应奠定了基础。
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2015.03.002