%0 Journal Article
%A 贯春雨
%A 李雪峰
%A 张含国*
%A 张瑶
%T 利用正交设计优化兴安落叶松RAPD-PCR反应体系
%D 2009
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2009.01.017
%J 植物研究
%P 80-85
%V 29
%N 1
%X 以兴安落叶松针叶DNA为模板,对影响落叶松RAPD-PCR 扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立兴安落叶松RAPDPCR反应的最佳体系。通过采用正交设计L16(45)对兴安落叶松RAPD-PCR反应的5因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、模板DNA、引物)在4个水平上进行优化试验，结果表明兴安落叶松最佳的RAPD-PCR的反应体系(20 μL)中含有模板90 ng，0.5 μmol·L-1的引物，1×反应缓冲液，DNTP各为0.25 mmol·L-1，1 U的Taq DNA聚合酶，Mg2+ 2.5 mmol·L-1。在此基础上筛选出20个扩增稳定、多态性丰富的RAPD引物,并通过梯度 PCR试验,确定了引物最佳退火温度。
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2009.01.017