%0 Journal Article
%A 范正琪
%A 李纪元*
%A 李辛雷
%A 殷恒福
%A 周兴文
%T 金花茶<em>FLS</em>基因的克隆及其植物表达载体的构建
%D 2013
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2013.01.010
%J 植物研究
%P 58-65
%V 33
%N 1
%X 利用RT-PCR和RACE技术，从我国珍稀濒危植物金花茶花瓣中获得了黄酮醇合成酶（Flavonol synthase，FLS）基因的cDNA全长，命名为<em>CnFLS</em>，GenBank登录号JF343560.1。根据该基因序列设计全长扩增引物P3/P4进行PCR扩增，将扩增产物插入PMD18-T载体并转化克隆菌株DH5&alpha;，提取质粒DNA酶切鉴定，通过酶切连接的方法将该基因与改造后的pCAMBIA1300表达载体连接，成功构建了该基因的正义表达载体pCAM-<em>CnFLS</em>。根据该基因的保守序列设计了含有酶切位点的特异引物G1/G2，扩增出250 bp的干扰片段并将其克隆到PMD18-T载体，在中间载体pUCCRNAi及表达载体pCAMBIA1300的基础上，通过多次酶切连接，成功构建了金花茶<em>FLS</em>基因的干扰表达载体pCAMRNAi-<em>CnFLS</em>。金花茶正义及干扰植物表达载体的成功构建，为进一步研究该基因的功能及其对花色的调控效应奠定了基础。
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2013.01.010