%0 Journal Article %A 刘群录* %A 宋会书 %A 唐东芹 %A 吴晨炜 %A 周凌瑜 %T 利用正交设计优化小苍兰ISSR-PCR反应体系 %D 2008 %R 10.7525/j.issn.1673-5102.2008.04.005 %J 植物研究 %P 402-407 %V 28 %N 4 %X 通过L₁₆(4⁵)正交试验，研究了镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度这5个因素在4个水平上对ISSR-PCR的影响，建立了适合于小苍兰ISSR-PCR的反应体系。优化体系为：25 μL PCR反应体系中含有1×Taq酶缓冲液(10 mmol·L^-1 KCl，8 mmol·L^-1(NH₄)₂SO₄，10 mmol·L^-1 Tris·HCl，pH 9.0，0.05% NP-40)，2 mmol·L^-1 MgCl₂，0.06 U·μL^-1 Taq酶，0.4 μmol·L^-1引物，4.0 ng·μL^-1模板DNA，dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.6 mmol·L^-1。利用温度梯度PCR，确定了最适宜的退火温度为51.5℃。该优化体系的建立为下一步对小苍兰进行ISSR分子标记奠定了基础。 %U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2008.04.005